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27.(1)DNA聚合酶、解旋酶(2分)细胞核(2分)(2)1/16(2分)1920(2分)(3)UUC(2分)
21.(除注明外,每空1分,共10分)(1)动物细胞壁、叶绿体、液泡(3分)(2)差速离心(3)核糖体粗面内质网进行有氧呼吸的主要场所,是细胞的“动力车间”,能为细胞生命活动提供能量(2分)⑩
表达载体),完成转化过程。(4)检测干扰素的基因是否表达,可用抗原一抗体杂交的技术进行检测,即用(干扰素的)抗体进行检测。19.(18分,除标注外,每空2分)(1)编码蛋白质的基因AtCBFI基因(2)使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸使目的基因DNA解聚为单链(3)DNA连接酶使目的基因和质粒定向连接、防止目的基因和质粒自身环化(3分)(4)抗原一抗体杂交在低温胁迫条件下,观察植株生长状况(3分)【解析】(1)目的基因主要是指编码蛋白质的基因,根据题干信息可以判断这项研究中的目的基因是AtCBFI基因。(2)在扩增AtCBFI基因的过程中,先根据AtCBFI基因的核苷酸序列设计引物,再进行PCR扩增,引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3端开始连接脱氧核苷酸。扩增的过程是:目的基因DNA受热变性后解聚为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在热稳定DNA聚合酶的作用下进行延伸,如此重复循环。反应体系的初始温度设置在90℃以上的目的是使目的基因DNA受热变性后解聚为单链。(3)DNA连接酶是基因的“针线”,回收PCR产物并酶切后用DNA连接酶将AtCBFI基因连接到T质粒上,以得到T-CBFI重组质粒。构建T-CBFI重组质粒时,同时使用BamHI和SacI进行双酶切,产生不同的黏性末端,可防止目的基因和质粒自身环化、使目的基因和质粒定向连接。(4)为确定转基因抗寒紫花苜蓿是否培育成功,既要从分子水平上用抗体进行抗原一抗体杂交实验,又要在个体水平上鉴定,在低温胁迫条件下观察植株生长状况,检测紫花首蓿的产量。
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